Alendronato sodico
C4H12NNaO7P2·3H2O 325.12
Acido fosfonico, (4-ammino-1-idrossibutilidene)bis-, sale monosodico, triidrato.
Sodio triidrogeno (4-ammino-1-idrossibutilidene)difosfonato, triidrato [121268-17-5].
» L'alendronato sodico contiene non meno del 98,0% e non più del 102,0% di C4H12NNaO7P2, calcolato su base essiccata.
Imballaggio e stoccaggio- Conservare in contenitori ben chiusi. Conservare a temperatura ambiente.
Norme di riferimento USP<11>-
USP Alendronato Sodico RS
Identificazione-
A: Assorbimento degli infrarossi <197M>.
B: Soddisfa i requisiti del test di fiamma per il sodio<191>.
Perdita all'essiccazione<731>- Essiccarlo ad una pressione non superiore a 5 mm di mercurio a 140 a peso costante: perde non meno del 16,1% e non più del 17,1% del suo peso.
Metalli pesanti, Metodo III<231>: 0,001%.
Purezza cromatografica-
Soluzione di borato e diluente- Preparare come indicato nel dosaggio.
Soluzione tampone- Trasferire 5,88 g di sodio citrato diidrato e 2,84 g di fosfato di sodio bibasico anidro in un matraccio tarato da 2-L, diluire con acqua a volume e mescolare. Regolare con acido fosforico ad un pH di 8 e far passare la soluzione attraverso un filtro avente una porosità di 0,5-μm o più fine.
9-Soluzione di fluoronilmetilcloroformiato- Preparare una soluzione in acetonitrile contenente circa 4 mg di 9-fluorenilmetil cloroformiato per mL. Preparare questa soluzione fresca appena prima dell'uso.
Soluzione A- Preparare una miscela filtrata e degasata di soluzione tampone e acetonitrile (17:3).
Soluzione B- Preparare una miscela filtrata e degasata di acetonitrile e soluzione tampone (7:3).
Fase mobile- Utilizzare miscele variabili di Soluzione A e Soluzione B come indicato per il sistema cromatografico. Se necessario, apportare le modifiche (vedere Idoneità del sistema in Cromatografia<621>).
Soluzione madre standard- Preparare una soluzione di Alendronate Sodium RS USP nel diluente avente una concentrazione nota di circa 0,6 mg per ml.
Soluzione standard- Trasferire 5,0 mL della soluzione madre standard in una provetta da centrifuga in polipropilene da 50 mL, con tappo a vite, contenente 5 mL di soluzione di borato. Aggiungere 5 ml di acetonitrile e 5 ml di soluzione di 9-Fluorenilmetil cloroformiato e agitare per 45 secondi. Lasciare riposare a temperatura ambiente per 30 minuti. Aggiungere 20 ml di cloruro di metilene e agitare vigorosamente per 1 minuto. Centrifugare per 5-10 minuti e utilizzare una porzione dello strato acquoso superiore trasparente.
Soluzione standard diluita- Diluire una porzione della soluzione madre standard con il diluente per ottenere una soluzione avente una concentrazione nota di circa 0,6 µg per ml. Utilizzando 5 mL di questa soluzione, procedere come indicato per la soluzione standard, iniziando con "in una provetta da centrifuga in polipropilene da 50-mL, con tappo a vite".
Reagente bianco- Utilizzando una porzione da 5,0-mL di diluente, procedere come indicato per la soluzione standard, iniziando con “in una provetta da centrifuga in polipropilene da 50-mL, con tappo a vite”.
Soluzione di prova- Trasferire circa 30 mg di alendronato sodico, accuratamente pesati, in un matraccio tarato da 50 ml, sciogliervi e diluire con il diluente a volume, quindi mescolare. Utilizzando un volume di 5,0-mL di questa soluzione, procedere come indicato per la soluzione standard, iniziando con “in una provetta da centrifuga in polipropilene da 50-mL, con tappo a vite”.
Sistema cromatografico (vedi Cromatografia<621>)- Il cromatografo liquido è dotato di un rilevatore da 266-nm e di una colonna da 4,1-mm × 25-cm che contiene l'impaccamento L21. La portata è di circa 1,8 ml al minuto. La temperatura della colonna viene mantenuta a circa 45. Il cromatografo è programmato come segue.
Tempo (minuti) Soluzione A (%) Soluzione B (%) Eluizione
0 100 0 equilibrazione
0-15 100→50 0→50 gradiente lineare
15-25 50→0 50→100 gradiente lineare
25-27 0→100 100→0 gradiente lineare
27-32 100 0 isocratico
Cromatografare la soluzione standard e la soluzione standard diluita e registrare le risposte dei picchi come indicato nella procedura: il fattore di scodamento per il picco principale nel cromatogramma della soluzione standard non è superiore a 2,0; e il picco in quel punto nel cromatogramma della soluzione standard diluita è rilevabile con un rapporto segnale-/rumore non inferiore a 3.
Procedura- Iniettare separatamente volumi uguali (circa 20 µL) della soluzione test e del bianco reagente nel cromatografo, registrare i cromatogrammi e misurare le risposte per tutti i picchi. Ignorare eventuali picchi corrispondenti a quelli ottenuti dal bianco Reagente. Calcolare la percentuale di ciascuna impurità nella porzione di Alendronato Sodico presa dalla formula:
100(ri/rs)
in cui ri è l'area di ciascun picco di impurità e rs è la somma di tutti i picchi di impurità e del picco principale: non si trova più dello 0,1% di ogni singola impurità e non si trova più dello 0,5% delle impurità totali.
Analisi-
Soluzione tampone- Trasferire 14,7 g di sodio citrato diidrato e 7,05 g di fosfato di sodio bibasico anidro in un matraccio tarato da 1-L, diluire con acqua a volume, mescolare e regolare con acido fosforico a pH 8.
Diluente- Sciogliere 29,4 g di sodio citrato diidrato in acqua in un matraccio tarato da 1-L, diluire con acqua a volume e mescolare.
Soluzione di borato- In un matraccio tarato da 1-l sciogliere 19,1 g di borato di sodio in acqua, diluire con acqua a volume e mescolare.
9-Soluzione di fluoronilmetilcloroformiato- Preparare una soluzione in acetonitrile contenente circa 0,5 mg di 9-fluorenilmetil cloroformiato per mL. Preparare questa soluzione fresca appena prima dell'uso.
Fase mobile- Preparare una miscela filtrata e degasata di soluzione tampone, acetonitrile e metanolo (70:25:5). Se necessario, apportare le modifiche (vedere Idoneità del sistema in Cromatografia<621>).
Preparazione standard dell'impasto- Preparare una soluzione di Alendronate Sodium RS USP nel diluente avente una concentrazione nota di circa 0,1 mg per ml. Calcolare la concentrazione, CS, dell'alendronato sodico anidro in questa soluzione.
Preparazione standard- Trasferire 5,0 mL della preparazione standard standard in una provetta da centrifuga in polipropilene da 50 mL, con tappo a vite, contenente 5 mL di soluzione di borato. Aggiungere 5 ml di soluzione di 9-Fluorenilmetilcloroformiato e agitare per 30 secondi. Lasciare riposare a temperatura ambiente per 25 minuti. Aggiungere 25 ml di cloruro di metilene e agitare vigorosamente per 1 minuto. Centrifugare per 5-10 minuti. Utilizzare una porzione dello strato acquoso superiore trasparente.
Reagente bianco- Utilizzando 5,0 mL di diluente, procedere come indicato per la preparazione dello standard, iniziando con “in una provetta da centrifuga in polipropilene da 50-mL, con tappo a vite”.
Preparazione delle scorte di analisi- Trasferire circa 25 mg di Alendronato Sodico, accuratamente pesati, in un matraccio tarato da 250-mL, sciogliervi e diluire con il Diluente a volume, e mescolare.
Preparazione del test- Utilizzando 5,0 mL della preparazione madre del test, procedere come indicato per la preparazione dello standard, iniziando con "in una provetta da centrifuga in polipropilene da 50-mL, con tappo a vite."
Sistema cromatografico (vedi Cromatografia<621>)- Il cromatografo liquido è dotato di un rilevatore da 266-nm e di una colonna da 4,1-mm × 25-cm che contiene l'impaccamento L21. La portata è di circa 1,2 ml al minuto. La temperatura della colonna viene mantenuta a circa 35. Cromatografare la preparazione dello standard e registrare le risposte dei picchi come indicato nella procedura: l'efficienza della colonna non è inferiore a 1500 piastre teoriche, il fattore di scodamento non è superiore a 1,5 e la deviazione standard relativa per le iniezioni replicate non è superiore al 2,0%.
Procedura: iniettare separatamente volumi uguali (circa 10 µl) della preparazione dello standard, della preparazione del test e del bianco reagente nel cromatografo, registrare i cromatogrammi e misurare le risposte per i picchi principali. Calcolare la quantità, in mg, di C4H12NNaO7P2 nella porzione di Alendronato Sodico assunta con la formula:
DCS (rU/rS)
in cui D è il fattore di diluizione per la preparazione del materiale di analisi; CS è quello definito nella preparazione standard dello stock; e rU e rS sono le risposte dell'area del picco per l'acido alendronico ottenute rispettivamente dalla preparazione del test e dalla preparazione dello standard.