Cloruro di colina
C5H14ClNO 139,62
(2-idrossietil)trimetilammonio cloruro;
2-idrossi-N,N,N-trimetiletanaminio cloruro [67-48-1].
DEFINIZIONE
Il cloruro di colina contiene NLT 99,0% e NMT 100,5% di cloruro di colina (C5H14ClNO), calcolato su base anidra.
IDENTIFICAZIONE
• A. Assorbimento degli infrarossi<197K>
• B. Test di identificazione-Generale, Cloruro<191>: una soluzione (1 su 20) soddisfa i requisiti.
SAGGIO
• Procedura
Campione: 120 mg
Sistema titrimetrico
(Vedi Titrimetria<541>.)
Modalità: titolazione diretta
Titolante: nitrato d'argento 0,1 N VS
Rilevamento del punto finale: potenziometrico
Vuoto: 35 ml di acqua. Aggiungere 3 gocce di acido acetico.
Analisi: sciogliere il campione in 35 mL di acqua e aggiungere 3 gocce di acido acetico. Titolare con il titolante.
Calcolare la percentuale di cloruro di colina (C5H14ClNO) presente nel Campione prelevato:
Risultato = [(V B) × N × F × 100]/W
V = volume del titolante del campione (mL)
B = volume del bianco titolante (mL)
N = normalità del titolante (mEq/mL)
F = fattore di equivalenza, 139,6 mg/mEq
W = peso del campione (mg)
Criteri di accettazione: 99,0%-100,5% su base anidra
IMPURITÀ
• Solventi residui<467>: soddisfa i requisiti, tranne per il fatto che il limite per 1,4-diossano è 10 µg/g
• Residuo all'accensione<281>: NMT 0,05%
• Arsenico, Metodo I<211>
Analisi: aggiungere 30 ml di acqua e 5 ml di acido cloridrico per sciogliere il campione.
Criteri di accettazione: NMT 2 ppm
• Guida<251>
[Nota-Utilizzare cloruro di metilene al posto del cloroformio per preparare la soluzione di estrazione di ditizone e la soluzione di ditizone standard. ]
Soluzione A: trasferire 8,4 g di soluzione di idrossido di sodio (1 su 2) in una bottiglia di plastica, aggiungere 100 ml di idrossido di ammonio e mescolare.
Soluzione standard: trasferire 1,0 ml della soluzione standard di piombo diluita in un imbuto separatore contenente 25,0 ml di acqua.
Soluzione campione: sciogliere 3,00 g di cloruro di colina in un imbuto separatore contenente 25,0 mL di acqua.
Analisi
Campioni: soluzione standard e soluzione campione
Aggiungere separatamente 6,0 ml di soluzione di citrato di ammonio e 3,0 ml di soluzione di cianuro di potassio alla soluzione standard e alla soluzione campione. Estrarre ciascuna delle soluzioni risultanti tre volte con porzioni da 5,0-mL di Dithizone Extraction Solution, agitando per 60 secondi e scaricando ciascun estratto in un altro separatore. Agitare le soluzioni combinate di ditizone per 30 s con 20,0 mL di acido nitrico (1 su 100) ed eliminare lo strato di cloruro di metilene. Aggiungere 6,0 ml di soluzione di ammoniaca-cianuro, 2 ml di soluzione A e 10 ml di soluzione standard di ditizone e agitare per 45 s. Lasciare separare le fasi e misurare l'assorbanza dello strato inferiore a 510 nm con uno spettrofotometro adatto.
Criteri di accettazione: L'assorbanza della soluzione Campione è NMT l'assorbanza della soluzione Standard (NMT 0,3 ppm).
• Metalli pesanti, Metodo II<231>: NMT 10 ppm
• Limite di ammine totali
Soluzione standard: 500 µg/mL di trimetilammina cloridrato in acqua
Soluzione campione: trasferire 10,0 g di cloruro di colina in un becher contenente un'ancoretta rivestita in plastica, aggiungere 170 ml di acqua e 30,0 ml di idrossido di sodio TS e mescolare fino alla dissoluzione.
Soluzione madre di idoneità del sistema: 10 µg/mL di trimetilammina cloridrato in acqua
Soluzione di idoneità del sistema: trasferire 10,0 ml di soluzione madre di idoneità del sistema in un becher contenente un'ancoretta di agitazione rivestita in plastica, aggiungere 160 ml di acqua e 30,0 ml di idrossido di sodio TS e mescolare fino alla dissoluzione.
Sistema di elettrodi: utilizzare un elettrodo indicatore specifico per il rilevamento del gas e per l'ammoniaca con riferimento interno collegato a un pHmetro in grado di misurare potenziali con una riproducibilità minima di ±0,1 mV (vedere pH 791).
Linea di risposta standard: mescolare 30,0 ml di idrossido di sodio TS e 170 ml di acqua. Aggiungere un'ancoretta di agitazione rivestita in plastica, inserire l'elettrodo nella soluzione e registrare il potenziale in mV. Continuare ad agitare e ad intervalli di 5-min aggiungere 0,200, 0,600, 1,00 e 2,00 mL di soluzione standard e registrare il potenziale dopo ogni aggiunta. Tracciare i logaritmi delle concentrazioni cumulative di trimetilammina cloridrato (0,50, 1,50, 2,50 e 5,00 µg/mL) rispetto al potenziale, in mV, e determinare la pendenza (S) della linea di risposta standard per l'elettrodo.
Idoneità del sistema
Esempio: soluzione di idoneità del sistema
Procedere come indicato in Analisi, tranne che per sostituire la soluzione Campione con la soluzione di idoneità del Sistema e nella formula seguente per sostituire W con V, che equivale a 10 mL.
Requisiti di idoneità: la variazione totale è NLT 10 mV per un'aggiunta cumulativa di 0,4-mL della soluzione standard; la quantità di trimetilammina cloridrato riscontrata è 8,5-11,5 µg/L.
Analisi
Campioni: soluzione standard e soluzione campione
Sciacquare l'elettrodo, inserirlo nella soluzione campione, mescolare e registrare il potenziale in mV. Aggiungere 0,100 ml della soluzione standard e registrare il potenziale. Aggiungere altri 0,100 ml di soluzione standard e registrare il potenziale. [Nota: se la variazione totale dopo la seconda aggiunta della soluzione standard è inferiore a 10 mV, aggiungere una terza aliquota di 0,200 mL.]
Calcolare il contenuto, in µg/g, di ammine totali come trimetilammina cloridrato nella porzione di campione prelevata:
Risultato = (CS × VA)/[(F 1) × W]
CS = concentrazione della soluzione standard (μg/mL)
VA = volume totale della soluzione standard aggiunta alla soluzione campione (mL)
W = peso di cloruro di colina prelevato per preparare la soluzione campione (g)
F = fattore di correzione, calcolato con la formula:
F = antilog [(mVF mV0)/S]
mVF = lettura finale dopo l'aggiunta della soluzione Standard (mV)
mV0 = lettura iniziale della soluzione Campione (mV)
S = pendenza della linea di risposta standard per l'elettrodo
Criteri di accettazione: NMT 10 µg/g
• Purezza cromatografica
Soluzione tampone: 7,1 g/L di sodio fosfato bibasico anidro. Regolare con acido fosforico ad un pH di 2,5.
Fase mobile: Soluzione tampone e acetonitrile (7:3)
Soluzione standard: trasferire una quantità, NMT 100 mg, di cloruro di colina RS USP in una fiala da 24-mL con tappo a vite-e aggiungere 400 mg di 3,5-dinitrobenzoil cloruro e 10 mL di acetonitrile. Tappare la fiala, riscaldare a 55 e continuare a riscaldare per 2 ore. Raffreddare a temperatura ambiente e aggiungere 5 ml di acqua. Lasciare riposare per 5 minuti. Trasferire quantitativamente la soluzione in un matraccio tarato da 25-mL e diluire con acetonitrile a volume. Diluire un volume di questa soluzione con la fase mobile per ottenere una concentrazione di 2,0 µg/mL di cloruro di colina RS USP.
Soluzione campione: trasferire 110 mg di cloruro di colina in una fiala da 24 ml con tappo a vite. Asciugare a 120 per 2 ore. Aggiungere 400 mg di 3,5-dinitrobenzoil cloruro e 10 mL di acetonitrile. Tappare la fiala, riscaldare a 55 e continuare a riscaldare per 2 ore. Raffreddare a temperatura ambiente e aggiungere 5 ml di acqua. Lasciare riposare per 5 minuti. Trasferire quantitativamente la soluzione in un matraccio tarato da 50-mL e diluire con la fase mobile a volume. Pipettare 2,0 mL della soluzione in un matraccio tarato da 25-mL e diluire con la fase mobile a volume.
Sistema cromatografico
(Vedere Cromatografia<621>, Idoneità del sistema.)
Modalità:LC
Rivelatore: UV 208 nm
Colonna: 4,6-mm × 25-cm; imballaggio L7
Temperatura della colonna: 30
Velocità di flusso: 1,0 ml/min
Dimensione dell'iniezione: 20 µl
Idoneità del sistema
Campione: soluzione standard
Requisiti di idoneità
Fattore di capacità (k'): NLT 2
Deviazione standard relativa: NMT 5%, determinata dal picco del derivato della colina
Analisi
Campioni: soluzione standard e soluzione campione
Calcolare la percentuale di ciascuna impurità nella porzione di Cloruro di Colina prelevata:
Risultato = (rU/rS) × (CS/CU) × 100
rU = risposta di picco per ciascuna impurità, escluso quello per il derivato della colina e l'acido 3,5-dinitrobenzoico dalla soluzione campione
rS = risposta di picco per il derivato della colina dalla soluzione standard
CS = concentrazione di cloruro di colina USP RS nella soluzione standard (mg/mL)
CU = concentrazione di cloruro di colina nella soluzione campione (mg/mL)
Criteri di accettazione
Impurezze individuali: NMT 0,3%
Impurezze totali: NMT 2,0%
TEST SPECIFICI
• pH<791>: 4,0-7,0, in una soluzione (1 su 10)
• Determinazione dell'acqua, Metodo I<921>: NMT 0,5%
REQUISITI AGGIUNTIVI
• Imballaggio e conservazione: conservare in contenitori ben chiusi.
• Standard di riferimento USP<11>
Cloruro di colina USP RS