Betadex solfobutiletere sodico
C42H70-nO35·(C4H8SO3Na)n 2163 quando n = 6,5
Beta ciclodestrina solfobutileteri, sali di sodio;
Beta ciclodestrina solfobutiletere sodico [182410-00-0].
DEFINIZIONE
Betadex Sulfobutyl Ether Sodium viene preparato mediante alchilazione di betadex utilizzando 1,4 - butano sultone in condizioni basiche
Il grado medio di sostituzione in betadex è NLT 6.2 e NMT 6.9.
Contiene NLT 95,0% e NMT 105,0% di C42H70-nO35·(C4H8SO3Na)n (n = 6,2-6,9), calcolato su base anidra.
IDENTIFICAZIONE
• A. ASSORBIMENTO INFRAROSSI<197K>
• B. Il tempo di ritenzione del picco maggiore della soluzione campione corrisponde a quello della soluzione standard, come ottenuto nel test.
• C. Soddisfa i requisiti del test per il grado medio di sostituzione.
• D. TEST DI IDENTIFICAZIONE-GENERALE, Sodio<191>
SAGGIO
• PROCEDURA
Fase mobile: nitrato di potassio 0,1 M in una miscela di acetonitrile e acqua (1:4)
Soluzione standard: 10 mg/ml di USP Betadex Sulfobutyl Ether Sodium RS in fase mobile
Soluzione campione: 10 mg/mL di Betadex Sulfobutyl Ether Sodium in fase mobile
Sistema cromatografico
(Vedere Cromatografia<621>, Idoneità del sistema.)
Modalità:LC
Rivelatore: indice di rifrazione
Temperatura del rilevatore: 35 ± 2°
Colonna: colonna analitica da 7,8-mm × 30-cm; imballaggio L37. [NOTA-Risciacquare la colonna con una soluzione di acetonitrile e acqua (1:9) al completamento della serie di corse.]
Velocità di flusso: 1,0 ml/min
Dimensione dell'iniezione: 20 µl
Idoneità del sistema.
Campione: soluzione standard
Requisiti di idoneità
Deviazione standard relativa: NMT 2,0%
Analisi
Campioni: soluzione standard e soluzione campione
Calcolare la percentuale di betadex solfobutil etere sodico [C42H70-nO35·(C4H8SO3Na)n] nella porzione di Betadex solfobutil etere sodico prelevata:
Risultato = (rU/rS) × (CS/CU) × 100
rU = risposta di picco per betadex solfobutiletere
sodio dalla soluzione campione
rS = risposta di picco per betadex solfobutiletere
sodio dalla soluzione standard
CS = concentrazione di USP Betadex Sulfobutyl Ether
Sodio RS nella soluzione standard (mg/mL)
CU = concentrazione di Betadex Sulfobutyl Ether Sodium nella soluzione campione (mg/mL)
Criteri di accettazione: 95,0%~105,0% su base anidra
IMPURITÀ
• METALLI PESANTI, Metodo II<231>: NMT 5 ppm
• LIMITE DI BETA CICLODESTRINA (BETADEX)
Soluzione A: idrossido di sodio 25 mM
Soluzione B: idrossido di sodio 250 mM e nitrato di potassio 1 M
Fase mobile: vedere la tabella 1.
Tabella 1

Soluzione standard: 2 µg/mL di Beta Ciclodestrina RS USP
Soluzione campione: 2 mg/mL di Betadex Sulfobutyl Ether Sodium
Sistema cromatografico
(Vedere Cromatografia<621>, Idoneità del sistema e Cromatografia ionica<1065>.)
Modalità: IC
Rivelatore: Amperometria pulsata (cella amperometrica con elettrodo di lavoro in oro ed elettrodo di riferimento in argento)
Colonna
Protezione: 4,0-mm × 5-cm anione-scambio; imballaggio L61
Analitico: 4,0-mm × 25-cm anionico-scambio;
imballaggio L61
Temperatura della colonna: 50 ± 2°
Velocità di flusso: 1,0 ml/min
Dimensione dell'iniezione: 20 µl
Forma d'onda per rilevatore amperometrico pulsato: vedere Tabella 2.
Tabella 2

Idoneità del sistema
Campione: soluzione standard
Requisiti di idoneità
Deviazione standard relativa: NMT 5,0%
Analisi
Campioni: soluzione standard e soluzione campione
Calcolare la percentuale di beta ciclodestrina (betadex) nella porzione di Betadex Sulfobutyl Ether Sodium prelevata:
Risultato = (rU/rS) × (CS/CU) × F × 100
rU = risposta di picco per la beta ciclodestrina dalla soluzione campione
rS = risposta di picco per la beta ciclodestrina dalla soluzione standard
CS = concentrazione di USP Beta Ciclodestrina RS nella soluzione standard (μg/mL)
CU = concentrazione di Betadex Sulfobutyl Ether Sodium nella soluzione campione (mg/mL)
F = fattore di conversione (10-3 mg/μg)
Criteri di accettazione: NMT 0,1%
• LIMITE DI 1,4-BUTANO SULTONE
Soluzione standard interna: 0,25 µg/mL di dietil solfone
Soluzione madre standard A: 0,5 µg/mL di 1,4-butano sultone
Soluzione madre standard B: 1,0 µg/mL di 1,4-butano sultone
Soluzione madre standard C: 2,0 µg/mL di 1,4-butano sultone
Soluzione madre del campione: 250 mg/mL di Betadex Sulfobutyl Ether Sodium nella soluzione standard interna
Soluzione del bianco e soluzioni campione A, B, C e D:
Seguire la Tabella 3 per inserire le quantità di soluzione standard interna, ciascuna soluzione madre standard, soluzione madre campione, acqua o cloruro di metilene in ciascuna provetta di vetro con tappo. [NOTA-È adatta una provetta da 10-mL con tappo a vite.] Mescolare su un miscelatore vortex ciascuna provetta per 30 s e lasciarla riposare per almeno 5 minuti o fino alla completa separazione della fase. Estrarre la fase organica in una fiala GC e sigillarla. [NOTA-Con molta attenzione, prelevare la quantità minima possibile di fase acquosa.] Le quantità aggiunte di 1,4-butano sultone nelle soluzioni campione A, B, C e D sono rispettivamente 0,5, 1,0, 2,0 e 0 µg.
Tabella 3

[NOTA-Preparare immediatamente prima dell'uso.]
Sistema cromatografico
(Vedere Cromatografia<621>, Idoneità del sistema.)
Modalità: GC
Rivelatore: Ionizzazione di fiamma
Colonna: colonna capillare in silice fusa da 0,32-mm × 25-m; Strato di fase G46 da 0,5-μm
Temperatura
Rivelatore: 270°
Porta di iniezione: 200°
Colonna: vedere il programma di temperatura nella tabella 4
Tabella 4
Temperatura iniziale (°) Rampa di temperatura (°/min) Temperatura finale (°) Tempo di mantenimento alla temperatura finale (min)
100 10 200 -
200 35 270 5
Gas di trasporto: elio, generalmente a una pressione di ingresso di 12 psi
Dimensione dell'iniezione: 1,0 µl
Tipo di iniezione: iniezione splitless per 0,5 minuti, quindi suddivisa a 50 ml/min. [NOTA-Si consiglia l'uso di un liner per iniezione splitless appropriato.]
Idoneità del sistema
Campione: soluzione campione B
[NOTA-I tempi di ritenzione relativi per dietil solfone e 1,4-butano sultone sono rispettivamente 0,7 e 1,0.]
Requisiti di idoneità
Deviazione standard relativa: NMT 10,0%
Analisi
Campioni: soluzione del bianco, soluzioni campione A, B, C e D
Correggere il rapporto delle risposte di picco dell'1,4-butano sultone rispetto al dietil solfone nella soluzione campione A, B, C o D sottraendo il rapporto delle risposte di picco dell'1,4-butano sultone all'etil solfone nella soluzione del bianco. Tracciare il rapporto corretto tra la risposta di picco dell'1,4-butano sultone e la risposta del picco del dietil solfone nella soluzione campione A, B, C o D, rispetto alla quantità aggiunta, in µg, di 1,4-butano sultone. Estrapola la linea che unisce i punti sul grafico finché non incontra l'asse delle quantità. La distanza tra questo punto e l'intersezione degli assi rappresenta la quantità di 1,4-butano sultone, A, in µg, nella porzione da 4-mL della soluzione madre del campione. Calcolare il contenuto di 1,4-butano sultone nella porzione di Betadex Sulfobutyl Ether Sodium prelevata:
Risultato = A/(VExt × CU × F)
A = determinato sopra
VExt = volume della soluzione madre del campione utilizzata nella fase di estrazione, 4,0 mL
CU = concentrazione di Betadex Sulfobutyl Ether Sodium nella soluzione madre del campione (mg/mL)
F = fattore di conversione (10-3 g/mg)
Criteri di accettazione: acido idrossibutano-1-solfonico o NMT 0,5 ppm
• LIMITE DI CLORURO DI SODIO, 4-IDROSSIBUTANO-1-ACIDO SOLFONICO E BIS(4-SOLFOBUTIL) ETERE DISODICO
Soluzione A: idrossido di sodio 5 mM, degassare in un recipiente chiuso per 15 minuti
Soluzione B: idrossido di sodio 25 mM, degassare in un recipiente chiuso per 15 minuti
Fase mobile: vedere la tabella 5
Tabella 5

Soluzione di lavaggio della colonna A: citrato di sodio 50 mM
Soluzione di lavaggio della colonna B: idrossido di sodio 150 mM
Soluzione standard: preparare una soluzione con concentrazioni note di 8 µg/mL di cloruro di sodio USP RS, 4 µg/mL di 4-idrossibutano-1-acido solfonico e 4 µg/mL di bis(4-sulfobutil) etere disodico.
Soluzione campione: 4 mg/mL di Betadex Sulfobutyl Ether Sodium
Sistema cromatografico
(Vedere Cromatografia<621>, Idoneità del sistema e Cromatografia ionica<1065>.)
Modalità: IC
Rivelatore: conduttività
Intervallo: 30 µS
Corrente: 100 mA
Colonna: [NOTA - Alla fine di ogni analisi, pulire la colonna utilizzando la soluzione di lavaggio della colonna A a una velocità di flusso di 1 ml/min per 35 minuti, quindi utilizzando la soluzione di lavaggio della colonna B alla stessa velocità di flusso per 35 minuti.]
Protezione: 4,0-mm × 5,0-cm anione-scambio; imballaggio L61
Analitico: 4,0-mm × 25-cm anionico-scambio; imballaggio L61
Temperatura della colonna: 30°
Soppressore: autosoppressore anionico a micromembrana1 o un sistema di soppressione chimica adeguato
Soppressore: autosoppressione
Velocità di flusso: 1,0 ml/min
Dimensione dell'iniezione: 20 µl
Idoneità del sistema
Campione: soluzione standard
[NOTA-I tempi di conservazione relativi sono forniti solo a titolo informativo. I tempi di ritenzione relativi per lo ione 4-idrossibutano-1-solfonato, lo ione cloruro e lo ione bis(solfobutil)etere sono rispettivamente 1,0, 1,4 e 8,6.]
Requisiti di idoneità
Risoluzione: NLT 2.0
Deviazione standard relativa: NMT 10,0%
Analisi
Campioni: soluzione standard e soluzione campione
Calcolare la percentuale di cloruro di sodio, acido 4-idrossibutano-1-solfonico o bis(sulfobutil)etere bisodico nella porzione di Betadex Sulfobutyl Ether Sodium prelevata:
Risultato = (rU/rS) × (CS/CU) × F × 100
rU = risposta di picco per cloruro di sodio, acido 4-idrossibutano-1-solfonico o bis(solfobutil)etere disodico dalla soluzione campione
rS = risposta di picco per cloruro di sodio, acido 4-idrossibutano-1-solfonico o bis(solfobutil)etere disodico dalla soluzione standard
CS = concentrazione di cloruro di sodio, acido 4-idrossibutano-1-solfonico o bis(solfobutil)etere bisodico nella soluzione standard (μg/mL)
CU = concentrazione di Betadex Sulfobutyl Ether Sodium nella soluzione campione (mg/mL)
F = fattore di conversione (10−3 0 100 0 mg/μg)
Criteri di accettazione
Cloruro di sodio: NMT 0,2%
4-Idrossibutano-1-acido solfonico: NMT 0,09%
Bis(sulfobutil)etere disodico: NMT 0,05%
TEST SPECIFICI
TEST DELLE ENDOTOSINE BATTERICHE<85>: Il livello delle endotossine batteriche è tale da poter soddisfare i requisiti previsti dalla/e monografia/i delle forme di dosaggio pertinenti in cui viene utilizzato Betadex Sulfobutyl Ether Sodium. Laddove l'etichetta indica che Betadex Sulfobutyl Ether Sodium deve essere sottoposto a ulteriore lavorazione durante la preparazione di forme di dosaggio iniettabili, il livello di endotossine batteriche è tale da soddisfare i requisiti previsti dalla monografia della forma di dosaggio pertinente in cui viene utilizzato Betadex Sulfobutyl Ether Sodium.
• TEST DI NUMERO MICROBICO<61>e TEST PER MICROORGANISMI SPECIFICI<62>: la conta microbica aerobica totale non supera 100 cfu/g e la conta totale combinata di muffe e lieviti non supera 50 cfu/g. Soddisfa i requisiti del test per l'assenza di Escherichia coli.
• CHIAREZZA DELLA SOLUZIONE
Soluzione del campione: soluzione al 30% (p/v).
Analisi: esaminare la soluzione campione utilizzando una scatola luminosa su sfondi bianchi e neri e registrare la presenza di eventuali foschie, fluorescenze, fibre, granelli o altri corpi estranei.
Criteri di accettazione: La soluzione è limpida e sostanzialmente priva di particelle di corpi estranei.
• GRADO MEDIO DI SOSTITUZIONE
Eseguire l'elettrolita: acido benzoico 30 mM e regolarlo a un pH adatto allo strumento utilizzato mediante l'aggiunta di tampone tris(idrossimetil) amminometano 100 mM.
[NOTA-A causa della variazione tra i capillari, non è specificato un unico pH elettrolitico universalmente applicabile.
Invece, il pH ottimale associato ad ogni singolo capillare dovrebbe essere determinato secondo il manuale dello strumento.]
Soluzione standard: 10 mg/ml di USP Betadex Sulfobutyl Ether Sodium RS
Soluzione campione: 10 mg/mL di Betadex Sulfobutyl Ether Sodium
Procedura di risciacquo capillare: utilizzare fiale di elettroliti separate per il risciacquo capillare e l'analisi del campione. Eseguire i risciacqui pre-analisi su base giornaliera prima di ogni analisi: sciacquare il capillare con idrossido di sodio 0,1 N per 30 minuti, con acqua per NLT 2 h e con Run elettrolyte per NLT 1 h. Eseguire i risciacqui pre-iniezione prima di ciascuna iniezione come segue. Sciacquare il capillare con idrossido di sodio 0,1 N per NLT 1 min e con l'elettrolita Run per NLT 3 min. Se viene utilizzato un nuovo capillare, oltre ai normali risciacqui sopra descritti, è necessario risciacquare il nuovo capillare prima del primo utilizzo. Sciacquare il nuovo capillare con idrossido di sodio 1 M per 1 h, seguito da un risciacquo con acqua di 2-h.
Sistema elettroforetico
(Vedere Elettroforesi capillare<1053>.)
Modalità: CE ad alte prestazioni
Rivelatore: UV inverso 200 nm, con una larghezza di banda di 20 nm. [NOTA-In alternativa è possibile utilizzare una lunghezza d'onda di rilevamento di 205 nm con una larghezza di banda di 10 nm.]
Colonna: picchi di sodio I–X (% area del picco) colonna di silice fusa 50-μm × 50-cm
Temperatura della colonna: 25°
Tensione applicata: da 0,00 a +30,00 kV rampa lineare in 10 min, poi a 30 kV per altri 20 min
Dimensione dell'iniezione: volumi uguali a 0,5 psi per 10 s
Idoneità del sistema
Campione: soluzione standard
[NOTA - Vedere la Tabella 6 per i tempi di migrazione relativi approssimativi per i picchi I–X di betadex solfobutil etere sodico I, II, III, ..., X, contiene una molecola di beta ciclodestrina con 1, 2, 3, ..., 10 sostituenti solfobutile, rispettivamente). I relativi tempi di migrazione sono solo a scopo informativo per facilitare l'identificazione del picco.]
Tabella 6

Requisiti di idoneità
Risoluzione: NLT 0,9, tra il picco IX di betadex sulfobutil etere sodico e il picco X di betadex sulfobutil etere sodico
Analisi
Campioni: eseguire l'elettrolita, l'acqua, la soluzione standard e la soluzione campione
Iniettare la soluzione standard e la soluzione campione applicando una pressione differenziale di 0,5 psi, equivalente a 34 mbar, per 10 s, seguita dall'iniezione dell'elettrolita avviato a 0,5 psi per 2 s. [NOTA-Le iniezioni a pressione devono essere effettuate con una fiala di acqua o con l'elettrolita all'estremità di uscita del capillare.]
Registrare gli elettroferogrammi e misurare le risposte di picco per i singoli picchi di betadex solfobutil etere sodico (da I a X). Calcolare l'area del picco corretta, AI, per ciascun picco nell'elettroferogramma:
Area del picco corretta A = Area del picco x Lunghezza capillare effettiva (cm) / Tempo di migrazione
Normalizzare le aree dei picchi corrette presentandole come percentuale dell'area totale dell'inviluppo di sostituzione corretta:
Area normalizzata, NA: A / n∑i=1 Ai x 100
n = livello di sostituzione più elevato
Determinare il grado medio di sostituzione:
Grado medio di sostituzione = n∑i=1 (Livello di sostituzione per picco x NA) / 100
Criteri di accettazione: 6,2~6,9 per il grado medio di sostituzione
Per ciascuno dei picchi I-X del betadex solfobutil etere sodico, vedere l'intervallo limite (% area del picco) nella Tabella 7.
Tabella 7

• PH<791>: 4,0-6,8, in una soluzione al 30% (p/v) in acqua priva di anidride carbonica-
• DETERMINAZIONE DELL'ACQUA, Metodo I<921>: NMT 10,0%
REQUISITI AGGIUNTIVI
• IMBALLAGGIO E CONSERVAZIONE: conservare in contenitori ben chiusi e conservare a temperatura ambiente. Proteggere dall'umidità.
• ETICHETTATURA: etichettarlo per indicarne l'uso nella produzione di forme di dosaggio iniettabili.
• NORME DI RIFERIMENTO USP<11>
USP Beta Ciclodestrina RS
USP Betadex solfobutil etere sodico RS
USP Endotossina RS
Cloruro di sodio USP RS***1S (NF30)