Istamina dicloridrato (CAS: 56-92-8) EP9.0 VolumeⅡMetodo di test
DEFINIZIONE
Il dicloridrato di istamina contiene non meno del 98,5% e non più dell'equivalente del 101,0% di 2-(1H-imidazol-4-il)etan-1-ammina dicloridrato, calcolato con riferimento alla sostanza essiccata.
PERSONAGGI
Polvere cristallina bianca o quasi bianca o cristalli incolori, igroscopici, molto solubili in acqua, solubili in alcool.
IDENTIFICAZIONE
Prima identificazione: A, D.
Seconda identificazione: B, C, D
A. Esaminare mediante spettrofotometria di assorbimento infrarosso (2.2.24), confrontandolo con lo spettro ottenuto con CRS di dicloridrato di istamina. Esaminare come dischi preparati utilizzando 1 mg di sostanza.
B. Esaminare i cromatogrammi ottenuti nel test per l'istidina. La macchia principale nel cromatogramma ottenuto con la soluzione di prova (b) è simile per posizione, colore e dimensione alla macchia principale nel cromatogramma ottenuto con la soluzione di riferimento (a).
C. Sciogliere 0,1 g in 7 mL di acqua R e aggiungere 3 mL di una soluzione da 200 g/L di idrossido di sodio R. Sciogliere 50 mg di acido solfanilico R in una miscela di 0,1 mL di acido cloridrico R e 10 mL di acqua R e aggiungere 0,1 mL di soluzione di nitrito di sodio R. Aggiungere la seconda soluzione alla prima e mescolare. Viene prodotto un colore rosso.
D. Dà la reazione (a) dei cloruri (2.3.1).
PROVE
Soluzione S. Sciogliere 0,5 g in acqua priva di anidride carbonica R preparata da acqua distillata R e diluire a 10 mL con lo stesso solvente.
Aspetto della soluzione. La soluzione S è limpida (2.2.1) e non più intensamente colorata della soluzione di riferimento Y7 (2.2.2, Metodo II).
pH (2.2.3). Il pH della soluzione S è compreso tra 2,85 e 3,60.
Istidina. Esaminare mediante cromatografia su strato sottile (2.2.27), utilizzando una piastra G di gel di silice TLC R.
Soluzione di prova (a). Sciogliere 0,5 g della sostanza da esaminare in acqua R e diluire a 10 mL con lo stesso solvente.
Soluzione di prova (b). Diluire 2 mL della soluzione di prova (a) a 10 mL con acqua R.
Soluzione di riferimento (a). Sciogliere 0,1 g di istamina dicloridrato CRS in acqua R e diluire a 10 mL con lo stesso solvente.
Soluzione di riferimento (b). Sciogliere 50 mg di istidina monocloridrato R in acqua R e diluire a 100 ml con lo stesso solvente.
Soluzione di riferimento (c). Mescolare 1 ml di soluzione di prova (a) e 1 ml di soluzione di riferimento (b).
Applicare sulla piastra 1 μL di soluzione di prova (a), 1 μL di soluzione di prova (b), 1 μL di soluzione di riferimento (a), 1 μL di soluzione di riferimento (b) e 2 μL di soluzione di riferimento (c). Sviluppare su un percorso di 15 cm utilizzando una miscela di 5 volumi di ammoniaca concentrata R, 20 volumi di acqua R e 75 volumi di acetonitrile R. Asciugare la lastra in corrente d'aria. Ripetere lo sviluppo nella stessa direzione, asciugare la lastra in corrente d'aria e spruzzare con soluzione di ninidrina R1. Riscaldare la piastra a 110°C per 10 min. Qualsiasi macchia corrispondente all'istidina nel cromatogramma ottenuto con la soluzione di prova (a) non è più intensa della macchia nel cromatogramma ottenuto con la soluzione di riferimento (b) (1%). Il test non è valido a meno che il cromatogramma ottenuto con la soluzione di riferimento (c) non mostri 2 punti chiaramente separati.
Solfati (2.4.13). 3 ml di soluzione S diluiti a 15 ml con acqua distillata R soddisfano il test limite per i solfati (0,1%).
Perdita all'essiccazione (2.2.32). Non più dello 0,5%, determinato su 0,20 g mediante essiccazione in stufa a 105 °C.
Ceneri solfatate (2.4.14). Non più dello 0,1%, determinato su 0,5 g.
SAGGIO
Sciogliere 0,080 g in una miscela di 5,0 mL di acido cloridrico 0,01 M e 50 mL di alcol R. Effettuare una titolazione potenziometrica (2.2.20), utilizzando idrossido di sodio 0,1 M. Leggi il volume aggiunto tra il primo e il terzo punto di flesso.
1 ml di idrossido di sodio 0,1 M equivale a 9,203 mg di C5H11Cl2N3.
STOCCAGGIO
Conservare in un contenitore ermetico, al riparo dalla luce.