DEFINIZIONE
L'arginina contiene non meno del 98,5% e non più dell'equivalente del 101,0% di acido (S)-2-ammino-5-guanidinopentanoico, calcolato con riferimento alla sostanza essiccata.
PERSONAGGI
Aspetto: polvere bianca o quasi bianca, cristallina o cristalli incolori, igroscopici. Solubilità: facilmente solubile in acqua, leggermente solubile in etanolo (96%).
IDENTIFICAZIONE
Prima identificazione: A, C.
Seconda identificazione: A,B,D,E
R. Rispetta il test di rotazione ottica specifica (vedi Test).
B. La Soluzione S (vedi Test) è fortemente alcalina (2.2.4).
C. Esaminare mediante spettrofotometria di assorbimento infrarosso (2.2.24), confrontandolo con lo spettro ottenuto con il CRS dell'arginina. Esaminare le sostanze preparate sotto forma di dischi.
D. Esaminare i cromatogrammi ottenuti nel test per le sostanze ninidrina-positive. La macchia principale nel cromatogramma ottenuto con la soluzione di prova (b) è simile per posizione, colore e dimensione alla macchia principale nel cromatogramma ottenuto con la soluzione di riferimento (a).
E. Sciogliere circa 25 mg in 2 ml di acqua R. Aggiungere 1 ml di soluzione di α-naftolo R e 2 ml di una miscela di volumi uguali di soluzione di ipoclorito di sodio forte R e acqua. Si sviluppa un colore rosso.
PROVE
Soluzione S. Sciogliere 2,5 g di acqua distillata e diluire a 50 ml con lo stesso solvente.
Aspetto della soluzione. La soluzione S è limpida (2.2.1) e non più intensamente colorata della soluzione di riferimento BY6 (2.2.2, Metodo II).
Rotazione ottica specifica (2.2.7). Sciogliere 2,00 g in acido cloridrico R1 e diluire a 25,0 ml con lo stesso acido. La rotazione ottica specifica va da + 25,5 a + 28,5, calcolata con riferimento alla sostanza essiccata.
Ninidrina-sostanze positive. Esaminare mediante cromatografia su strato sottile (2.2.27), utilizzando una piastra di gel di silice TLC R.
Soluzione di prova (a). Sciogliere 0,10 g della sostanza da esaminare in acido cloridrico diluito e diluire a 10 ml con lo stesso acido.
Soluzione di prova (b). Diluire 1 ml della soluzione di prova (a) a 50 ml con acqua R.
Soluzione di riferimento (a). Sciogliere 10 mg di arginina CRS in acido cloridrico 0,1 M e diluire a 50 ml con lo stesso acido.
Soluzione di riferimento (b). Diluire 5 ml della soluzione di prova (b) a 20 ml con acqua R.
Soluzione di riferimento (c). Sciogliere 10 mg di arginina CRS e 10 mg di lisina cloridrato CRS in acido cloridrico 0,1 M e diluire a 25 ml con lo stesso acido.
Applicare sulla piastra 5 μl di ciascuna soluzione. Lasciare asciugare la piastra all'aria. Sviluppare su un percorso di 15 cm utilizzando una miscela di 30 volumi di ammoniaca concentrata R e 70 volumi di 2-propanolo R. Essiccare la piastra a 100°C-105°C fino alla completa scomparsa dell'ammoniaca. Spruzzare con la soluzione di ninidrina R e riscaldare a una temperatura compresa tra 100°C e 105°C per 15 minuti. Qualsiasi macchia nel cromatogramma ottenuto con la soluzione di prova (a), ad eccezione della macchia principale, non è più intensa della macchia nel cromatogramma ottenuto con la soluzione di riferimento (b) (0,5%). Il test non è valido a meno che il cromatogramma ottenuto con la soluzione di riferimento (c) non mostri due punti chiaramente separati.
Cloruri (2.4.4). A 5 ml di soluzione S aggiungere 0,5 ml di acido nitrico R diluito e diluire a 15 ml con acqua R. La soluzione soddisfa il test limite per i cloruri (200 ppm).
Solfati (2.4.13). A 10 ml di soluzione S aggiungere 1,7 ml di acido cloridrico diluito R e diluire a 15 ml con acqua distillata R. La soluzione è conforme al test limite per i solfati (300 ppm).
Ammonio (2.4.1). 50 mg sono conformi al test limite B per l'ammonio (200 ppm). Preparare lo standard utilizzando 0,1 ml di soluzione standard di ammonio (100 ppm NH4) R.
Ferro (2.4.9). In un imbuto separatore, sciogliere 1,0 g in 10 ml di acido cloridrico diluito R. Agitare con tre quantità, ciascuna di 10 ml, di metil isobutil chetone R1, agitando ogni volta per 3 minuti. Agli strati organici combinati aggiungere 10 ml di acqua Rand agitare per 3 minuti. Lo strato acquoso soddisfa il test limite per il ferro (10 ppm).
Metalli pesanti (2.4.8). Sciogliere 2,0 g in acqua R e diluire a 20 ml con lo stesso solvente. 12 ml di soluzione sono conformi al test limite A per i metalli pesanti (10 ppm). Preparare lo standard utilizzando la soluzione standard di piombo (1 ppm Pb) R.
Perdita all'essiccazione (2.2.32). Non più dello 0,5%, determinato su 1.000 g mediante essiccazione in forno a 105 ℃
Ceneri solfatate (2.4.14). Non più dello 0,1%,determinato su 1,0 g.
SAGGIO
Sciogliere 0,150 g in 50 ml di acqua R. Utilizzando 0,2 ml di soluzione mista di rosso metile indicatore Ras, titolare con acido cloridrico 0,1 M fino a viraggio dal verde al rosso violaceo.
1 ml di acido cloridrico 0,1 M equivale a 17,42 mg di C6H14N4O2.
STOCCAGGIO
Conservare al riparo dalla luce.