Lanolina
La lanolina è la sostanza purificata, simile alla cera, ricavata dalla lana di pecora, Ovis aries Linné (Fam. Bovidae), che è stata pulita, decolorata e deodorata. Non contiene più dello 0,25% di acqua. Può contenere non più dello 0,02% di un antiossidante adatto.
Imballaggio e stoccaggio- Conservare in contenitori ben chiusi, preferibilmente a temperatura ambiente controllata.
Etichettatura- L'etichetta afferma che non deve essere utilizzato non diluito.
Norme di riferimento USP<11>-
USP Lanolina RS
Intervallo di fusione Classe II<741>: tra 38 e 44, determinato su un provino precedentemente raffreddato tra 8 e 10.
Acidità<401>-Gli acidi liberi in 10,0 g richiedono per la neutralizzazione non più di 2,0 mL di idrossido di sodio 0,10 N.
Alcalinità-Sciogliere 2,0 g in 10 mL di etere e aggiungere 2 gocce di fenolftaleina TS: il liquido non si colora di rosso.
Acqua- Sciogliere circa 25 g, accuratamente pesati, in 75 mL di un solvente misto costituito da 3 parti di cloroformio e 2 parti di metanolo, e diluire con solvente misto a 100,0 mL. Determinare il contenuto di acqua di una porzione da 10,0-mL come indicato in Determinazione dell'acqua, Metodo I<921>. Eseguire una determinazione in bianco su 10,0 mL di solvente misto e apportare le eventuali correzioni necessarie. Non si trova più dello 0,25%.
Residuo alla combustione<281>: non più dello 0,1%.
Acidi e alcali solubili in acqua- Scaldare 10,0 g con 50 mL di acqua su un bagno di vapore, mescolando continuamente il composto fino allo scioglimento della Lanolina: il grasso si separa completamente durante il raffreddamento, lasciando lo strato d'acqua quasi limpido e neutro alla tornasole. Conservare lo strato d'acqua.
Sostanze ossidabili idrosolubili- Una porzione da 10-mL della soluzione del test per acidi e alcali idrosolubili non decolora completamente 50 µL di permanganato di potassio 0,10 N entro 10 minuti.
Cloruro<221>- Far bollire 20 mL di alcool con 1,0 g di Lanolina sotto un refrigerante a ricadere, raffreddare, aggiungere 1 mL di acido nitrico 2 N, filtrare e al filtrato aggiungere 5 gocce di una soluzione di nitrato d'argento in alcool (1 su 50): l'eventuale torbidità prodotta non supera quella di un bianco a cui sono stati aggiunti 0,50 mL di acido cloridrico 0,020 N (0,035%).
Ammoniaca- Aggiungere 1 mL di idrossido di sodio 1 N a una porzione da 10-mL della soluzione del test per acidi e alcali idrosolubili e far bollire: i vapori non virano al rosso tornasole blu.
Indice di iodio<401>: tra 18 e 36, determinato su un campione da 780 a 820 mg.
Sostanze estranee- [nota- Utilizzare reagenti e solventi di qualità priva di pesticidi durante questo test. I materiali di riferimento dei pesticidi da utilizzare nella preparazione standard possono essere ottenuti da qualsiasi fonte commerciale.* ]
Soluzioni madre standard- Preparare soluzioni madre in esano, ciascuna avente una concentrazione nota di 100 mg di pesticida di riferimento per L. [nota-Le soluzioni madre concentrate possono essere conservate al buio in contenitori di vetro-con tappo in frigorifero da 2 a 5 per un massimo di 1 anno. La maggior parte dei pesticidi può essere disciolta direttamente nell'esano; tuttavia, gli isomeri dell'esaclorocicloesano e i pesticidi del gruppo DDT possono richiedere la dissoluzione iniziale nel volume minimo di acetone seguita dalla diluizione con esano alla concentrazione specificata.]
Preparazione standard- Diluire quantitativamente i volumi accuratamente misurati delle soluzioni madre standard con esano e combinarli per ottenere una preparazione standard composita avente le concentrazioni indicate nella Tabella 1. Conservare la preparazione standard composita in un contenitore di vetro con tappo di vetro al buio da 2 a 5 e sostituirla ogni 2 mesi. [nota-Se necessario, è possibile preparare due o più preparati standard compositi separati, ciascuno contenente preferibilmente non più di 8 pesticidi di riferimento. I pesticidi di riferimento dovrebbero essere selezionati per le preparazioni standard composite sulla base del fatto che i tempi di ritenzione relativi (vedere Tabella 1) differiscono sufficientemente in modo tale che si prevede che i picchi nei cromatogrammi non si sovrappongano, e dovrebbero essere selezionati e combinati in modo appropriato per il sistema cromatografico e il rilevatore utilizzati.]
Sistema di pulizia per cromatografia a permeazione di gel -
eluente-Preparare una miscela di cloruro di metilene ed esano (1:1).
Tabella 1
Preparazione standard (concentrazione in µg per mL) Tempi di ritenzione relativi (rispetto a 1,0 per il clorpirifos)
Pesticida di riferimento* Elettrone- rilevatore di cattura Fiamma- rilevatore fotometrico Sistema I Sistema II
Tetracloronitrobenzene [TCBN] 0,05 - 0,29 0,24
alfa esaclorocicloesano (alfa BHC) 0,05 - 0,40 0,35
beta esaclorocicloesano (beta BHC) 0,30 - 0,43 0,56
Esaclorobenzene (HCB) 0,05 - 0,45 0,33
gamma Esaclorocicloesano (Lindano) 0,05 - 0,48 0,41
Propetamphos - 0,30 0,48 0,42
Diazinon - 0,20 0,52 0,40
Diclofentione 0,10 0,20 0,67 0,56
Ronnel 0,30 0,40 0,81 0,66
Eptacloro 0,10 - 0,83 0,60
Malathion - 0,40 0,91 1,05
Clorpirifos 0,30 0,30 1,00 1,00
Aldrin 0.20 - 1,05 0,76
Pirimifos etile - 0,40 1,14 1,14
Clorfenvinfos Z 0,40 0,40 1,17 1,40
Epossido eptacloro 0,20 - 1.29 1.17
Clorfenvinfos E 0,40 0,50 1,30 1,51
Bromofos etile 0,40 0,50 1,51 1,45
1,1¢-dicloro-2-(2-clorofenil)-2-(4-clorofenil)etene (o,p-DDE) 0,30 - 1,55 1,51
1,1¢-dicloro-2-(4-clorofenil)-2-(4-clorofenil)etene (p,p-DDE) 0,30 - 1,88 1,86
Stirofos 0,60 0,80 1,58 1,97
alfa endosulfan 0,40 - 1,63 1,47
1,1¢-dicloro-2-(2-clorofenil)-2-(4-clorofenil)etano (o,p-TDE) 0,40 - 1,902,19
Dieldrin 0,30 - 1,91 1,84
Endrin 0.40 - 2.13 2.29
beta endosulfan 0,40 - 2.19 2.77
1,1-dicloro-2,2-bis(4-clorofenil)etano (p,p-TDE) 0,40 - 2.41 2.87
1,1,1-tricloro-2-(2-clorofenil)-2-(4-clorofenil)etano (o,p-DDT) 0,40 - 2,552,70
Etion 1,00 0,40 2,56 3,36
Carbofenotione 0,80 1,00 2,94 3,70
1,1,1-tricloro-2,2-bix(4-clorofenil)etano (p,p¢-DDT) 0,50 - 3,13 3,50
Metossicloro 0,60 - 4.707.20
Carbofenotion Sulfone 5.00 - 5.10 9.20
Carbofenotion solfossido 5.00 - 5.40 10.00
* I materiali idonei possono essere ottenuti da Chem Service, 660 Tower Lane, P.O. Box 3108, Westchester, PA 19381-3108 o Greyhound, 88 Grange Road West, Birkenhead, Merseyside, L43 4XF, Inghilterra Regno Unito
apparato-Il cromatografo a permeazione di gel è dotato di una colonna da 25-mm × 50-cm, riempita con un impasto liquido di 35 g di sfere di copolimero di stirene-divinilbenzene compresse fino a una lunghezza del letto di circa 20 cm. L'eluente viene pompato ad una portata di circa 5 ml al minuto con una pressione operativa compresa tra 8 e 11 psi. Preparare il cromatografo, regolandolo per scartare la frazione che eluisce da 0 a 12 minuti, raccogliere la frazione che eluisce da 12 a 32 minuti e risciacquare per 2 minuti, scartando la frazione di risciacquo.
Idoneità del sistema-
eluizione della lanolina - Sciogliere una quantità adeguata di lanolina e farla passare attraverso una carta da filtro scanalata in un contenitore. Trasferire circa 6,0 g di lanolina calda filtrata, accuratamente pesata, in un matraccio tarato da 50-mL. Diluire con Eluant fino a volume, mescolare e filtrare. Trasferire 5,0 mL di questa soluzione nella colonna cromatografica a permeazione di gel ed eluire con Eluant. Raccogliere 100 mL dell'effluente della colonna in bicchieri tarati con incrementi di 10-mL. Far evaporare il solvente, raffreddare, pesare i bicchieri e il contenuto e calcolare la quantità di lanolina eluita in ciascun incremento di 10-mL. La colonna è idonea se non meno del 96% della lanolina eluisce nei primi 60 mL.
eluizione del pesticida dalla lanolina - Sciogliere quantità adeguate di diazinon, diclofention, bromofos etile, lindano e dieldrin in esano per ottenere una soluzione standard avente concentrazioni, in ciascun mL, rispettivamente di 0,4, 0,4, 1,0, 0,1 e 0,6 µg. Trasferire 5,0 mL di questa soluzione in un matraccio tarato da 10-mL contenente 1 g di USP Lanolin RS, diluire con cloruro di metilene a volume e mescolare. Trasferire 5 ml di questa soluzione nella colonna cromatografica a permeazione di gel ed eluire con 160 ml di eluente. Scartare la prima frazione da 60-mL e raccogliere la frazione successiva da 100-mL (da 60 a 160 mL). Trasferire questa frazione di raccolta in un concentratore dotato di un pallone di raccolta tarato, aggiungere 50 mL di esano e concentrare per evaporazione a 5 mL. Iniettare circa 5 µl di questa frazione nei cromatografi descritti nel sistema cromatografico I e nel sistema cromatografico II, registrare i cromatogrammi e misurare le altezze dei picchi ottenuti dai cinque pesticidi nella soluzione standard. Calcolare i recuperi di ciascuno dei cinque pesticidi utilizzati nella soluzione fortificata USP Lanolin RS. Preparare una soluzione di prova mescolando l'esano con la soluzione standard (1:1). Iniettare 5 µl della soluzione di prova nei cromatografi descritti nel sistema cromatografico I e nel sistema cromatografico II, registrare i cromatogrammi e misurare le altezze dei picchi dei cinque pesticidi nel cromatogramma della soluzione di prova. Confrontare le altezze dei picchi ottenute dalla frazione della soluzione standard con le altezze dei picchi dei corrispondenti pesticidi ottenuti dalla soluzione di prova: viene recuperato non meno dell'85% delle quantità aggiunte di ciascuno dei cinque pesticidi.
Preparazione del test-Trasferire circa 6 g di lanolina, accuratamente pesati e precedentemente sciolti in forma liquida riscaldando a bagnomaria se necessario, in un matraccio tarato da 50-mL, sciogliere in 25 mL di eluente, diluire con l'eluente a volume, mescolare e filtrare. Trasferire 5,0 ml di questa soluzione nella colonna ed eluire con 160 ml di eluente. Scartare la prima frazione da 60-mL e raccogliere la frazione rimanente in un evaporatore adatto. Concentrare per evaporazione su bagno di vapore a circa 3 mL, aggiungere circa 50 mL di esano ed evaporare nuovamente per eliminare ogni traccia di cloruro di metilene, aggiustando il volume con esano a 3,0 mL.
Sistema cromatografico I (vedi Cromatografia<621>)-Il gascromatografo è dotato di un rilevatore-di cattura di elettroni e di una colonna capillare di silice fusa da 0,53-mm × 30-m legata con uno strato di fase G1 da 1,5-μm e una colonna di guardia non rivestita di silice fusa da 0,53-mm × 6-m collegata a un sistema iniettore di tipo a colonna impaccata modificata-. La temperatura della colonna viene mantenuta a 200. [nota-La temperatura iniziale della colonna può essere regolata in modo che i tempi di ritenzione di p,p¢-DDT e etion siano rispettivamente circa 3,1 e 2,56 rispetto al clorpirifos.] L'elio viene utilizzato come gas di trasporto. La portata di circa 25 ml al minuto viene regolata in modo tale che il tempo di ritenzione del clorpirifos sia di circa 4 minuti. La portata del gas di makeup, l'azoto, è di circa 40 minuti.
Sistema cromatografico II-Il gascromatografo è dotato di un rilevatore di fiamma-fotometrico e di una colonna capillare di silice fusa da 0,53-mm × 30-m legata con uno strato di fase G3 da 1,0-μm e una colonna di guardia non rivestita di silice fusa da 0,53-mm × 6-m collegata a un sistema iniettore di tipo a colonna impaccata modificata. La temperatura della colonna viene mantenuta a 200. [nota-La temperatura iniziale della colonna può essere regolata in modo che il tempo di ritenzione dell'etion sia circa 3,36 rispetto a quello del clorpirifos.] L'elio viene utilizzato come gas di trasporto a una portata di circa 25 ml al minuto, regolata in modo che il tempo di ritenzione del clorpirifos sia di circa 4 minuti. La portata del gas di makeup, l'azoto, è di circa 40 ml al minuto. [nota-Determinare la sensibilità del rilevatore per i sistemi cromatografici I e II: selezionare l'attenuazione dell'elettrometro in modo che l'iniezione di 1,5 ng di clorpirifos produca una deflessione del 50% dell'intera scala su un registratore o una stampante-plotter. Se queste condizioni del rilevatore sono al di fuori dell'intervallo lineare del rilevatore, regolare l'intervallo lineare e registrare la quantità, in ng, di clorpirifos che produce una deflessione del fondo scala del 50% in queste condizioni.]
Procedura-[nota-La procedura descritta di seguito deve essere seguita per i sistemi cromatografici I e II. ] Iniettare separatamente volumi uguali (circa 5 µL) della preparazione standard composita appropriata e della preparazione del test nel gascromatografo, registrare i cromatogrammi e misurare le aree di tutti i picchi osservati nei cromatogrammi. Confrontare le aree dei picchi di uno qualsiasi dei residui di pesticidi nel cromatogramma della preparazione Test ottenuta da ciascun sistema cromatografico con quelle dei picchi che corrispondono ai tempi di ritenzione nel cromatogramma dell'appropriata preparazione Standard composita ottenuta da ciascuno dei corrispondenti sistemi cromatografici. Calcolare la quantità, in ppm, del singolo residuo specificato presente nel campione prelevato con la formula:
30(C / O)(rU / rS)
in cui rU e rS sono le aree dei picchi del residuo presente nella preparazione Test e nella preparazione Standard; rispettivamente; C è la concentrazione, in mg per L, del pesticida di riferimento nel preparato Standard; e W è il peso, in g, della lanolina prelevata: non vengono trovati più di 10 ppm di ogni singolo residuo specificato e il totale di tutti i residui specificati trovati non supera 40 ppm.
Petrolato-Scaldare circa 3 g, accuratamente pesati, su un bagno di vapore, agitando spesso, finché la perdita di peso non sarà inferiore al contenuto di acqua. Far bollire 40 mL di alcool disidratato con 500 mg della lanolina essiccata così ottenuta: la soluzione è limpida o non più che opalescente.