Fluorouracile
C4H3FN2O2 130,08
2,4(1H,3H)-pirimidinedione, 5-fluoro-;
5-fluorouracile [51-21-8]; UNII: U3P01618RT.
DEFINIZIONE
Il fluorouracile contiene NLT 98,0% e NMT 102,0% di uorouracil (C4H3FN2O2), calcolato su base essiccata.
[ATTENZIONE- È necessario prestare la massima attenzione per evitare di inalare particelle di fluorouracile e di esporre la pelle ad esso.]
IDENTIFICAZIONE
Cambia in:
• A. TEST DI IDENTIFICAZIONE SPETTROSCOPICA<197>, Spettroscopia Infrarossa: 197M (CN 1-MAGGIO-2020)
Cambia in:
• B. TEST DI IDENTIFICAZIONE SPETTROSCOPICA<197>, Spettroscopia ultravioletta-Visibile: 197U (CN 1-MAGGIO-2020)
Mezzo: tampone acetato a pH 4,7 preparato da 8,4 g di acetato di sodio e 3,35 mL di acido acetico glaciale mescolati con acqua per ottenere 1000 mL
Soluzione del campione: 10 µg/mL in terreno
Criteri di accettazione: Soddisfa i requisiti
• C. Il tempo di ritenzione del picco maggiore della soluzione Campione corrisponde a quello della soluzione Standard, come ottenuto nel dosaggio.
SAGGIO
• PROCEDURA
Tampone: 6,8 g/L di fosfato di potassio monobasico in acqua. Regolare con idrossido di potassio 5 M fino a un pH di 5,7 ± 0,1.
Fase mobile: acetonitrile e tampone (5:95)
Soluzione standard: 10 µg/mL di fluorouracile RS USP in acqua
Soluzione campione: 10 µg/mL di Fluorouracile in acqua
Sistema cromatografico
(Vedere Cromatografia<621>, Idoneità del sistema.)
Modalità:LC
Rivelatore: UV 254 nm
Colonna: 4,6-mm × 25-cm; 5-μm imballaggio L1
Velocità di flusso: 1,0 ml/min
Volume di iniezione: 20 µl
Idoneità del sistema
Campione: soluzione standard
Requisiti di idoneità
Deviazione standard relativa: NMT 0,73%, Soluzione standard
Fattore di scodamento: NMT 1,5, soluzione standard
Analisi
Campioni: soluzione standard e soluzione campione
Calcolare la percentuale di uorouracil (C4H3FN2O2) nella porzione di Fluorouracile assunta:
Risultato = (ru /rs ) × (Cs /Cu ) × 100
ru = risposta di picco dalla soluzione campione
rs = risposta di picco dalla soluzione Standard
Cs = concentrazione di Fluorouracile RS USP nella soluzione standard (μg/mL)
Cu = concentrazione di fluorouracile nella soluzione campione (μg/mL)
Criteri di accettazione: 98,0%-102,0% su base essiccata
IMPURITÀ
• RESIDUO ALL'ACCENSIONE<281>: NMT 0,1%
• IMPURITÀ ORGANICHE
Proteggere la soluzione standard e la soluzione campione dalla luce.
Fase mobile: 6,8 g/L di fosfato di potassio monobasico in acqua. Regolare con idrossido di potassio 5 M fino a un pH di 5,7 ± 0,1.
Soluzione standard: 0,1 µg/mL ciascuno di USP Fluorouracil RS, USP Fluorouracil Related Compound A RS, USP Fluorouracil Related
Composto B RS e USP Uracil RS e 0,2 µg/mL di composto E RS correlato al fluorouracile USP in fase mobile
Soluzione campione: 0,1 mg/mL di Fluorouracile in fase mobile
Sistema cromatografico
(Vedere Cromatografia<621>, Idoneità del sistema.)
Modalità:LC
Rivelatore: UV 266 nm
Colonna: 4,6-mm × 25-cm; 5-μm imballaggio L1
Velocità di flusso: 1,0 ml/min
Volume di iniezione: 20 µl
Tempo di esecuzione: NLT 3 volte il tempo di ritenzione del picco dell'urouracile
Idoneità del sistema
Campione: soluzione standard
Requisiti di idoneità
Risoluzione: NLT 2 tra i picchi dell'uracile e dell'urouracile
Analisi
Campioni: soluzione standard e soluzione campione
Calcolare la percentuale del composto A correlato all'uorouracil, del composto B correlato all'uorouracil e dell'uracile nella porzione di
Fluorouracile assunto:
Risultato = (ru /rs ) × (Cs /Cu ) × 100
ru = risposta di picco del relativo composto correlato all'urouracile dalla soluzione campione
rs = risposta di picco del relativo composto correlato all'urouracile dalla soluzione standard
Cs = concentrazione del composto correlato all'urouracile nella soluzione standard (mg/mL)
Cu = concentrazione di fluorouracile nella soluzione campione (mg/mL)
Calcolare la percentuale di 5-metossiuracile, composto E correlato all'uorouracil e qualsiasi impurità non specificata nella porzione di
Fluorouracile assunto:
Risultato = (ru /rs ) × (Cs /Cu ) × (1/F) × 100
ru = risposta di picco di ciascuna impurità dalla soluzione campione
rs = risposta di picco dell'urouracile dalla soluzione standard
Cs = concentrazione di Fluorouracile RS USP nella soluzione standard (mg/mL)
Cu = concentrazione di fluorouracile nella soluzione campione (mg/mL)
F = fattore di risposta relativo per ogni singola impurità (vedere Tabella 1)
Criteri di accettazione: vedere la Tabella 1. Ignorare eventuali picchi di impurità inferiori allo 0,05%.
Tabella 1
Nome Tempo di ritenzione relativo Fattore di risposta relativo Criteri di accettazione, NMT (%)
Composto A correlato al fluorouracile a 0,5 – 0,15
Composto correlato al fluorouracile B b 0,7 – 0,15
Uracile 0,9 – 0,15
Nome Tempo di ritenzione relativo Fattore di risposta relativo Criteri di accettazione, NMT (%)
Fluorouracile 1.0 – -
5-metossiuracile c 1,6 0,67 0,15
Composto correlato al fluorouracile E d 1,9 0,77 0,15
Qualsiasi impurità individuale non specificata – 1,0 0,10
Impurezze totali – - 0,5
  a Pirimidina-2,4,6(1H,3H,5H)-trione.
  b Diidropirimidina-2,4,5(3H)-trione.
  c5-metossipirimidina-2,4(1H,3H)-dione.
  d 5-Cloropirimidina-2,4(1H,3H)-dione.
• LIMITI DEI COMPOSTI CORRELATI AL FLUOROURACILE F E DELL'UREA
Diluente: metanolo e acqua (1:1)
Soluzione standard A: 0,025 mg/ml di composto F RS correlato al fluorouracile USP nel diluente
Soluzione standard B: 0,02 mg/mL di USP Urea RS in metanolo
Soluzione campione: 10 mg/mL di fluorouracile nel diluente
Sistema cromatografico
(Vedere Cromatografia<621>, Cromatografia su strato sottile.)
Modalità: TLC
Adsorbente: miscela cromatografica di gel di silice
Volume di applicazione: 10 µl
Sistema solvente di sviluppo: acetato di etile, metanolo e acqua (70:15:15)
Reagente: preparare una soluzione da 10-mg/mL di p-dimetilamminobenzaldeide in alcol anidro. Preparare una miscela di questa soluzione
e acido cloridrico (10:1).
Analisi
Campioni: soluzione standard A, soluzione standard B e soluzione campione
Procedura: sviluppare con un sistema di solventi di sviluppo, seguito da asciugatura all'aria. Esaminare la piastra sotto luce UV a 254 nm per
composto correlato all'urouracile F. Spruzzare la piastra almeno due volte con il reagente e asciugare la piastra in un forno a 80° per 3–4 minuti.
Esaminare la piastra alla luce del giorno per individuare l'urea. [NOTA- L'urea produce una macchia gialla e l'uorouracil non viene rilevato dallo spray.]
Criteri di accettazione: la macchia del composto F correlato all'urouracile nella soluzione del campione non è più intensa della macchia di
composto F correlato all'urouracile dalla soluzione standard A (NMT 0,25%). La macchia di urea nella soluzione campione non è maggiore
intenso rispetto allo spot di urea dalla soluzione standard B (NMT 0,2%).
TEST SPECIFICI
• PERDITE ALL'ESSICCAZIONE<731>
Analisi: Essiccare sotto vuoto su anidride fosforica a 80° per 4 h.
Criteri di accettazione: NMT 0,5%
REQUISITI AGGIUNTIVI
• IMBALLAGGIO E CONSERVAZIONE: Conservare in contenitori stretti e resistenti alla luce.
• NORME DI RIFERIMENTO USP<11>
Fluorouracile USP RS
Composto A RS correlato al fluorouracile USP
Pirimidina-2,4,6(1H,3H,5H)-trione.
C4H4N2O3 128.09
Composto B RS correlato al fluorouracile USP
Diidropirimidina-2,4,5(3H)-trione.
C4H4N2O3 128.09
Composto correlato al fluorouracile USP E RS
5-Cloropirimidina-2,4(1H,3H)-dione.
C4H3ClN2O2 146,53
Composto correlato al fluorouracile USP F RS
2-etossi-5-uoropirimidina-4(1H)-uno.
C6H7FN2O2 158.13
USP Uracil RS
Uracile.
C4H4N2O2 112.09