Paclitaxel
C47H51NO14 853,91
Acido benzenepropanoico, -(benzoilammino)--idrossi-, 6,12b-bis(acetilossi)-12-(benzoilossi)-2a,3,4,4a,5,6,9,10,11,12,12a,12b-dodecaidro-4,11-d iidrossi-4a,8,13,13-tetrametil-5-osso-7,11-metano-1H-ciclodeca[3,4]benz[1,2-b]oxet-9-il estere, [2aR-[2a,4,4a,6,9(R*,S*),11,12,12a,12b]]-.
(2aR,4S,4aS,6R,9S,11S,12S,12aR,12bS)-1,2a,3,4,4a,6,9,10,11,12,12a,12b-Dodecaidro-4,6,9,11,1 2,12b-esaidrossi-4a,8,13,13-tetrametil-7,11-metano-5H-ciclodeca[3,4]-benz[1,2-b]oxet-5-one 6,12b-diacetato, 12-benzoato, 9-estere con (2R,3S)-N-benzoil-3-fenilisoserina [33069-62-4].
Paclitaxel contiene non meno del 97,0% e non più del 102,0% di C47H51NO14, calcolato su base anidra e priva di solventi.
[Attenzione-Paclitaxel è citotossico. È necessario prestare la massima attenzione per evitare di inalare particelle di Paclitaxel e di esporre la pelle ad esso.]
Imballaggio e conservazione-Conservare in contenitori stretti e resistenti alla luce-e conservare a temperatura ambiente controllata.
Etichettatura-L'etichettatura indica il tipo di processo utilizzato per produrre il materiale e il test dei composti correlati a cui il materiale è conforme.
Norme di riferimento USP<11>-
USP Endotossina RS
USP Paclitaxel RS Fare clic per visualizzare la struttura
Composto A RS correlato al paclitaxel USP
Cefalomannino.
Composto B RS correlato al paclitaxel USP
10-Deacetile-7-Epipaclitaxel.
Miscela di impurità USP Paclitaxel RS
Miscela di Paclitaxel e dei seguenti composti correlati: analogo del propile, cefalomanina, analogo del sec-butile, analogo del n-butile, analogo del benzile, baccatina VI, analogo del pentile e 7-epipaclitaxel.
Identificazione-
A: Assorbimento degli infrarossi <197K>.
B: Il tempo di ritenzione del picco maggiore nel cromatogramma della preparazione del test corrisponde a quello nel cromatogramma della preparazione dello standard, come ottenuto nel test.
Rotazione specifica 781S: tra 49,0 e 55,0 a 20, calcolata su base anidra, priva di solventi-esente.
Soluzione test: 10 mg per ml, in metanolo.
Test di enumerazione microbica<61>e test per microrganismi specificati<62>-La conta microbica aerobica totale non supera 100 cfu per g. Soddisfa i requisiti dei test per l'assenza di Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, specie Salmonella ed Escherichia coli.
Endotossine batteriche 85-Contiene non più di 0,4 unità di endotossina USP per mg di paclitaxel.
Acqua, Metodo Ic<921>: non più del 4,0%.
Residuo alla combustione<281>: non più dello 0,2%.
Metalli pesanti, Metodo II<231>: 0,002%.
Composti correlati-
test 1 (per materiale etichettato come isolato da fonti naturali)-Se il materiale è conforme a questo test, l'etichetta indica che soddisfa il Test 1 dei composti correlati alla USP.
Diluente-Preparare come indicato nel dosaggio.
Soluzione A-Preparare acetonitrile filtrato e degasato.
Soluzione B-Preparare acqua filtrata e degasata.
Fase mobile-Utilizzare miscele variabili di Soluzione A e Soluzione B come indicato per il sistema cromatografico. Se necessario, apportare le modifiche (vedere Idoneità del sistema in Cromatografia 621).
Soluzione di idoneità del sistema-Sciogliere quantità accuratamente pesate di composto A RS correlato al paclitaxel USP e di composto B RS correlato al paclitaxel USP in metanolo per ottenere una soluzione con concentrazioni note di circa 10 µg di ciascuno per mL. Trasferire 5,0 mL di questa soluzione in un matraccio tarato da 50-mL, diluire con Diluente a volume e mescolare.
Soluzione standard - Sciogliere, con l'aiuto della sonicazione, una quantità accuratamente pesata di USP Paclitaxel RS nel diluente e diluire quantitativamente, e gradualmente se necessario, con il diluente per ottenere una soluzione avente una concentrazione nota di circa 5 µg per mL.
Soluzione del test-Utilizzare la preparazione del test.
Sistema cromatografico (vedi Cromatografia<621>)-Il cromatografo liquido è dotato di un rilevatore da 227-nm e di una colonna da 4,6-mm × 25-cm che contiene un impaccamento L43 da 5-μm. La portata è di circa 2,6 ml al minuto. La temperatura della colonna viene mantenuta a 30. Il cromatografo è programmato come segue.
Tempo (minuti) Soluzione A (%) Soluzione B (%) Eluizione
0–35 35 65 isocratico
35–60 35®80 65®20 gradiente lineare
60–70 80®35 20®65 gradiente lineare
70–80 35 65 Cromatografare isocratica la soluzione di idoneità del sistema e registrare le risposte di picco come indicato per la Procedura: i tempi di ritenzione relativi sono circa 0,78 per il composto A correlato al paclitaxel e 0,86 per il composto B correlato al paclitaxel (rispetto al tempo di ritenzione per il paclitaxel ottenuto dalla soluzione test); e la risoluzione, R, tra il composto A correlato al paclitaxel e il composto B correlato al paclitaxel non è inferiore a 1,0. Cromatografare la soluzione standard e registrare le risposte di picco come indicato nella procedura: la deviazione standard relativa per le iniezioni replicate non è superiore al 2,0%.
Procedura-Iniettare un volume (circa 15 µL) della soluzione test nel cromatografo, registrare il cromatogramma e misurare le aree dei picchi principali. Calcolare la percentuale di ciascuna impurezza nella porzione di Paclitaxel prelevata con la formula:
100(Ven / ru)
in cui F è il fattore di risposta relativo per ciascun picco di impurità (vedere la Tabella 1 per i valori); ri è l'area del picco per ogni singola impurità; e rU è l'area del picco del paclitaxel.
Tabella 1
Tempo di ritenzione relativo Fattore di risposta relativo (F) Nome Limite (%)
0,24 1,29 Baccatina III 0,2
0,53 1,00 10-Deacetilpaclitaxel 0,5
0,57 1,00 7-Xilosilpaclitaxel 0,2
0,78 1,26 Cefalomannina (composto A correlato al paclitaxel) a11
0,78 1,26 2'',3''-Diidrocefalomannina a21
0,86 1,00 10-Deacetil-7-epipaclitaxel (composto B correlato al paclitaxel) 0,5
1,10 1,00 Analogo benzilico3 b12
1,10 1,00 3'',4''-Deidropaclitaxel C b22
1,40 1,00 7-Epicefalomannina 0,3
1,85 1,00 7-Epipaclitaxel 0,5
1 Per tali picchi la risoluzione potrebbe essere incompleta a seconda delle relative quantità presenti; la somma di a1 e a2 non è superiore allo 0,5%.
2 Per tali picchi la risoluzione potrebbe essere incompleta, a seconda delle relative quantità presenti; la somma di b1 e b2 non è superiore allo 0,5%.
3 Al composto correlato, analogo benzilico, viene assegnato il seguente nome chimico: Baccatin III 13-estere con acido (2R,3S)-2-idrossi-3-fenil-3-(2-fenilacetilammino)propanoico.
Oltre a non superare i limiti per le impurezze correlate al paclitaxel nella Tabella 1, non si trova più dello 0,1% di ogni altra singola impurezza; e non si trova più del 2,0% delle impurità totali.
test 2 (per materiale etichettato come prodotto mediante un processo semisintetico): se il materiale è conforme a questo test, l'etichettatura indica che soddisfa il test 2 dei composti correlati alla USP.
Diluente - Usa acetonitrile.
Soluzione A-Utilizzare una miscela filtrata e degasata di acqua e acetonitrile (3:2).
Soluzione B-Utilizzare acetonitrile filtrato e degasato.
Fase mobile-Utilizzare miscele variabili di Soluzione A e Soluzione B come indicato per il sistema cromatografico. Se necessario, apportare le modifiche (vedere Idoneità del sistema in Cromatografia 621).
Soluzione di idoneità del sistema-Sciogliere quantità accuratamente pesate di USP Paclitaxel RS e USP Paclitaxel Related Compound B RS nel diluente, agitando e sonicando se necessario, per ottenere una soluzione con concentrazioni note di circa 0,96 mg e 0,008 mg per mL, rispettivamente.
Soluzione test-Trasferire circa 10 mg di Paclitaxel, accuratamente pesati, in un matraccio tarato da 10-mL, sciogliervi e diluire con il Diluente a volume, agitando e sonicando se necessario, e mescolare.
Sistema cromatografico (vedere Cromatografia 621)— Il cromatografo liquido è dotato di un rilevatore da 227-nm e di una colonna da 4,6-mm × 15-cm che contiene un impaccamento L1 da 3-μm. La portata è di circa 1,2 ml al minuto. La temperatura della colonna viene mantenuta a 35. Il cromatografo è programmato come segue.
Tempo (minuti) Soluzione A (%) Soluzione B (%) Eluizione
0-20 100 0 isocratico
20-60 100®10 0®90 gradiente lineare
60-62 10®100 90®0 gradiente lineare
62-70 100 0 isocraticCromatografare la soluzione di idoneità del sistema e registrare le risposte di picco come indicato per la Procedura: i tempi di ritenzione relativi sono circa 0,94 per il composto B correlato al paclitaxel e 1,0 per il paclitaxel; la risoluzione, R, tra il composto B correlato al paclitaxel e il paclitaxel non è inferiore a 1,2; e la deviazione standard relativa per le iniezioni ripetute non è superiore al 2,0%.
Procedura-Iniettare separatamente volumi uguali (circa 15 µL) del diluente e della soluzione test nel cromatografo, registrare i cromatogrammi e misurare le aree di tutti i picchi. Ignorare eventuali picchi dovuti al Diluente. Calcolare la percentuale di ciascuna impurezza nella porzione di Paclitaxel prelevata con la formula:
100(ven/rs)
in cui F è il fattore di risposta relativo per ciascuna impurezza (vedere la Tabella 2 per i valori); ri è l'area del picco per ciascuna impurità ottenuta dalla soluzione Test; e rs è la somma delle aree di tutti i picchi ottenuti dalla soluzione Test.
Tabella 2
Tempo di ritenzione relativo Fattore di risposta relativo (F) Nome Limite (%)
0,11 1,24 10-Deacetilbaccatina III 0,1
0,20 1,29 Baccatin III 0,2
0,42 1,39 Fotodegradante2 0,1
0,47 1,00 10-Deacetilpaclitaxel 0,5
0,80 1,00 2-Debenzoilpaclitaxel-2-pentenoato 0,7
0,921 1,00 Anello di ossetano aperto, acetile e benzoile migrati2 x1
0,921 1,00 10-Acetoacetilpaclitaxel x2
0,941 1,00 10-Deacetil-7-epipaclitaxel (composto B correlato al paclitaxel) x3
1,37 1,00 7-Epipaclitaxel 0,4
1,45 1,00 10,13-Bissidechainpaclitaxel2 0,5
1,54 1,00 7-Acetilpaclitaxel 0,6
1,80 1,75 13-Tes-baccatina III 0,1
2,14 1,00 7-Tes-paclitaxel 0,3
1 Per tali picchi la risoluzione potrebbe essere incompleta a seconda delle relative quantità presenti; la somma di x1, x2 e x3 non è superiore allo 0,4%.
2 I seguenti nomi chimici sono assegnati ai relativi composti Fotodegradante; Anello di ossetano aperto, acetile e benzoile migrati; e 10,13-Bissidechainpaclitaxel:
Fotodegradante
(1R,2R,4S,5S,7R,10S,11R,12S,13S,15S,16S)-2,10-diacetilossi-5,13-diidrossi-4,16,17,17-tetra metil-8-ossa-3-osso-12-fenilcarbonilossipentaciclo[11.3.1.01,11.04,11.07,10]eptadec-15-il
(2R,3S)-2-idrossi-3-fenil-3-(fenilcarbonilammino)propanoato
L'anello dell'ossetano si è aperto, l'acetile e il benzoile sono migrati
(1S,2S,3R,4S,5S,7S,8S,10R,13S)-5,10-diacetilossi-1,2,4,7-tetraidrossi-8,12,15,15-tetrametil-9-osso-4-(fenilcarbonilossimetil)triciclo[9.3.1.03,8]pentadec-11-en-13-ile
(2R,3S)-2-idrossi-3-fenil-3-(fenilcarbonilammino)propanoato
10,13-Paclitaxel a catena bisside
Baccatin III 13-estere con (2R,3S)-2-idrossi-3-fenil-3-(fenilcarbonilammino)acido propanoico, 10-estere con (2S,3S)-2-idrossi-3-fenil-3-(fenilcarbonilammino)propanoico
Oltre a non superare i limiti per le impurezze correlate al paclitaxel nella Tabella 2, non si trova più dello 0,1% di ogni altra singola impurezza; e non si trova più del 2,0% delle impurità totali.
test 3 (per materiale etichettato come prodotto da un processo di fermentazione di cellule vegetali): se il materiale è conforme a questo test, l'etichettatura indica che soddisfa il test 3 dei composti correlati all'USP.
Soluzione A-Preparare una miscela filtrata e degasata di acqua e acetonitrile (3:2).
Soluzione B-Preparare acetonitrile filtrato e degasato.
Fase mobile-Utilizzare miscele variabili di Soluzione A e Soluzione B come indicato per il sistema cromatografico. Se necessario, apportare le modifiche (vedere Idoneità del sistema in Cromatografia 621).
Soluzione di idoneità del sistema - Sciogliere USP Paclitaxel Impurity Mixture RS in acetonitrile, sonicando se necessario, per ottenere una soluzione avente una concentrazione nota di circa 1 mg per mL.
Soluzione standard - Sciogliere una quantità accuratamente pesata di USP Paclitaxel RS in acetonitrile, sonicando se necessario, per ottenere una soluzione avente una concentrazione nota di circa 1 mg per mL.
Soluzione test-Trasferire circa 10 mg di Paclitaxel, accuratamente pesati, in un matraccio tarato da 10-mL. Sciogliere e diluire con acetonitrile a volume, sonicando se necessario, e mescolare.
Sistema cromatografico (vedere Cromatografia 621)— Il cromatografo liquido è dotato di un rilevatore da 227-nm e di una colonna da 4,6-mm × 15-cm che contiene un impaccamento L1 da 3-μm. La portata è di circa 1,2 ml al minuto. Il cromatografo è programmato come segue.
Tempo (minuti) Soluzione A (%) Soluzione B (%) Eluizione
0-28 100 0 isocratico
28-33 100®98 0®2 gradiente lineare
33–58 98®10 2®90 gradiente lineare
58-60 10 90 isocratico
60-63 10®100 90®0 gradiente lineare
63-70 100 0 isocraticChromatograph la soluzione di idoneità del sistema e registrare le risposte di picco come indicato per la procedura: la risoluzione, R, tra paclitaxel e analogo benzilico non è inferiore a 1,8. Cromatografare la soluzione standard e registrare le risposte di picco come indicato nella procedura: la deviazione standard relativa per le iniezioni replicate non è superiore al 2,0%. [nota: ai fini dell’identificazione dei picchi, i tempi di ritenzione relativi approssimativi sono riportati nella Tabella 3. I tempi di ritenzione relativi sono misurati rispetto a Paclitaxel. ]
Tabella 3
Nome Limite di tempo di conservazione relativo (%)
Analogo propilico1 0,54 0,2
Cefalomannina (composto A correlato al paclitaxel) 0,76 0,5
sec-Analogo butilico2 0,81 0,2
n-Analogo butilico3 0,89 0,1
Analogo benzilico 1,10 0,4
Baccatina VI 1,23 0,2
Analogo del pentile4 1,31 0,2
7-Epipaclitaxel 1,51 0,4
1 Il seguente nome chimico è assegnato al composto correlato Analogo del propile: Baccatin III 13-estere con (2R,3S)-3-butanoilammino-2-idrossi-3-acido fenilpropanoico.
2 Il seguente nome chimico è assegnato al composto correlato sec-Analogo butilico:Baccatin III 13-estere con (2R,3S)-2-idrossi-3-(2-metilbutanoilammino)-3-acido fenilpropanoico.
3 Il seguente nome chimico è assegnato al composto correlato n-Analogo butilico:Baccatina III 13-estere con acido (2S,3S)-2-idrossi-3-(pentanoilammino)-3-acido fenilpropanoico.
4 Il seguente nome chimico è assegnato al composto correlato Analogo del pentile: Baccatin III 13-estere con (2R,3S)-3-(esanoilammino)-2-idrossi-3-acido fenilpropanoico.
Procedura-Iniettare un volume (circa 12 µL) della soluzione test nel cromatografo, registrare il cromatogramma e misurare le aree di tutti i picchi. Calcolare la percentuale di ciascuna impurezza nella porzione di Paclitaxel prelevata con la formula:
100(ri/rU)
in cui ri è la risposta di ogni singola impurità; e rU è la somma delle aree di tutti i picchi ottenuti dalla soluzione Test. Oltre a non superare i limiti per le impurezze correlate al paclitaxel nella Tabella 3, non viene trovato più dello 0,1% di ogni altra singola impurezza; e non si trova più del 2,0% delle impurità totali.
Analisi-
Diluente-Preparare una miscela di metanolo e acido acetico (200:1).
Fase mobile-Preparare una miscela filtrata e degasata di acqua e acetonitrile (11:9). Se necessario, apportare le modifiche (vedere Idoneità del sistema in Cromatografia 621).
Preparazione standard - Sciogliere, utilizzando la sonicazione se necessario, una quantità accuratamente pesata di USP Paclitaxel RS nel diluente e diluire quantitativamente, e gradualmente se necessario, con il diluente per ottenere una soluzione con una concentrazione nota di circa 1 mg per mL.
Preparazione del test-Trasferire circa 10 mg di Paclitaxel, accuratamente pesati, in un matraccio tarato da 10-mL. Sciogliere nel diluente, utilizzando la sonicazione se necessario, diluire con il diluente a volume e mescolare.
Sistema cromatografico (vedi Cromatografia<621>)-Il cromatografo liquido è dotato di un rilevatore da 227-nm e di una colonna da 4,6-mm × 25-cm che contiene un impaccamento L43 da 5-μm. La portata è di circa 1,5 ml al minuto. Cromatografare la preparazione dello standard e registrare le risposte di picco come indicato nella procedura: il fattore di scodamento è compreso tra 0,7 e 1,3; e la deviazione standard relativa per le iniezioni ripetute non è superiore all'1,5%.
Procedura-Iniettare separatamente volumi uguali (circa 10 µL) della preparazione dello standard e della preparazione del test nel cromatografo, registrare i cromatogrammi e misurare le aree dei picchi principali. Calcolare la quantità, in mg, di C47H51NO14 nella porzione di Paclitaxel prelevata con la formula:
10C(rU/rS)
in cui C è la concentrazione, in mg per ml, di Paclitaxel RS USP nella preparazione Standard; e rU e rS sono le risposte di picco per il paclitaxel ottenute rispettivamente dalla preparazione del test e dalla preparazione dello standard.