Phloroglucinolum dihydricum
C6H6O3,2H2O Signor 162.1
[6099-90-7]
DEFINIZIONE
Benzene-1,3,5-triolo diidrato.
Contenuto: dal 99,0% al 101,0% (sostanza secca).
PERSONAGGI
Aspetto: polvere bianca o quasi bianca.
Solubilità: scarsamente solubile in acqua, facilmente solubile in etanolo (96%), praticamente insolubile in cloruro di metilene.
IDENTIFICAZIONE
A. Spettrofotometria di assorbimento infrarosso (2.2.24).
Preparazione: essiccare preventivamente la sostanza da esaminare in forno a 105℃.
Confronto: floroglucinolo anidro CRS.
B. Cromatografia su strato sottile (2.2.27).
Soluzione di prova. Sciogliere 0,20 g della sostanza da esaminare in metanolo R e diluire a 10 mL con lo stesso solvente.
Soluzione di riferimento. Sciogliere 0,20 g di cloroglucinolo anidro CRS in metanolo R e diluire a 10 mL con lo stesso solvente.
Piastra: piastra TLC gel di silice F254 R.
Fase mobile: acido formico anidro R, esano R, acetato di etile R (2:37,5:62,5 V/V/V).
Applicazione: 10μL.
Sviluppo: oltre i 2/3 del piatto.
Rivelazione: esaminare alla luce ultravioletta a 254 nm.
Risultati: la macchia principale nel cromatogramma ottenuto con la soluzione in esame è simile per posizione e dimensione alla macchia principale nel cromatogramma ottenuto con la soluzione di riferimento.
C. Perdita all'essiccazione (vedi test).
PROVE
Soluzione S. Sciogliere 2,50 g in etanolo (96%) R e diluire a 25 mL con lo stesso solvente.
Aspetto della soluzione. La soluzione S è limpida (2.2.1) e non più intensamente colorata della soluzione di riferimento BY5 (2.2.2, Metodo II).
pH (2.2.3): da 4,0 a 6,0.
Diluire 10 mL di soluzione S in 100 mL con acqua priva di anidride carbonica R.
Sostanze correlate. Cromatografia liquida (2.2.29). Preparare le soluzioni immediatamente prima dell'uso e proteggerle dalla luce.
Miscela di solventi: fase mobile B, fase mobile A (10:90 V/V).
Soluzione di prova. Sciogliere 50 mg della sostanza da esaminare nella miscela di solventi e diluire a 10,0 mL con la miscela di solventi.
Soluzione di riferimento (a). Diluire 1,0 ml della soluzione di prova a 100,0 ml con la miscela di solventi. Diluire 1,0 ml di questa soluzione a 10,0 ml con la miscela di solventi.
Soluzione di riferimento (b). Sciogliere 6 mg ciascuno di resorcinolo R (impurità B), floroglucide R (impurità D) e pirogallolo R (impurità A) in 10 mL della miscela di solventi, aggiungere 2 mL della soluzione di prova e diluire a 20,0 mL con la miscela di solventi. Diluire 1,0 ml di questa soluzione a 50,0 ml con la miscela di solventi.
Soluzione di riferimento (c). Sciogliere 4 mg ciascuno di pirogallolo R (impurità A), floroglucide R (impurità D), benzene-1,2,4-triolo R (impurità E), 2,6-diclorofenolo R (impurità I), 4-clororesorcinolo R (impurità K) e 3,5-dicloroanilina R (impurità L) in 10 mL della miscela di solventi e diluire a 20,0 ml con la miscela di solventi.
Soluzione di riferimento (d). Sciogliere 10 mg della sostanza da esaminare in 10 mL di miscela di solventi, aggiungere 1,0 mL di soluzione di riferimento (c) e diluire a 20,0 mL con la miscela di solventi.
Colonna:
- dimensione: l = 0,25 m, Ø = 4,0 mm;
- fase stazionaria: gel di silice ottadecilsilil end-capped per
cromatografia con gruppi polari R incorporati (5 μm)
Fase mobile:
-fase mobile A: 1,36 g/L di soluzione di potassio diidrogeno fosfato R precedentemente portata a pH 3,0 con acido fosforico R;
-fase mobile B: acetonitrile R;
Tempo (min) Fase mobile A (percentuale V/V) Fase mobile B (percentuale V/V)
0- 9 100 0
9- 15 100 → 50 0 → 50
15- 25 50 → 20 50 → 80
25- 30 20 80
Velocità di flusso: 1,0 ml/min.
Rilevazione: spettrofotometro a 265 nm.
Iniezione: 20 μL della soluzione test e delle soluzioni di riferimento (a), (b) e (d).
Identificazione delle impurezze: utilizzare il cromatogramma ottenuto con la soluzione di riferimento (d) per identificare i picchi dovuti alle impurezze A, D, E, I, K e L.
Ritenzione relativa con riferimento al floroglucinolo
(tempo di ritenzione = circa 12 min): impurità E = circa 0,7;
impurità A = circa 0,9; impurità D = circa 1,3;
impurità B = circa 1,35; impurità K = circa 1,5;
impurità I = circa 1,8; impurità L = circa 2,0.
Idoneità del sistema: soluzione di riferimento (b):
-risoluzione: minimo 2,5 tra i picchi dovuti all'impurezza A e al floroglucinolo; minimo 4,0 tra i picchi a causa delle impurità D e B.
Limiti:
-fattori di correzione: per il calcolo del contenuto, moltiplicare le aree dei picchi delle seguenti impurità per il corrispondente fattore di correzione: impurità A = 0,6;
impurità D = 0,2; impurità E = 0,7; impurità I = 0,6;
impurità K = 0,6; impurità L = 0,4;
-impurità A, D, E, I, K, L: per ciascuna impurità, non più di
1,5 volte l'area del picco principale nel cromatogramma
ottenuto con la soluzione di riferimento (a) (0,15%);
-impurezze non specificate: per ciascuna impurezza, non più dell'area del picco principale nel cromatogramma ottenuto con la soluzione di riferimento (a) (0,10 %);
-totale: non più di 3 volte l'area del picco principale nel cromatogramma ottenuto con la soluzione di riferimento (a) (0,3 %);
-limite di ignorabilità: 0,5 volte l'area del picco principale in
il cromatogramma ottenuto con la soluzione di riferimento (a) (0,05%).
Cloruri (2.4.4): massimo 200 ppm.
Diluire 2,5 ml di soluzione S a 15 ml con acqua R.
Solfati (2.4.13): massimo 500 ppm.
Diluire 3 ml di soluzione S a 15 ml con acqua distillata R.
Perdita all'essiccazione (2.2.32): dal 20,0% al 23,0%, determinata su 1.000 g mediante essiccazione in forno a 105 ℃.
Ceneri solfatate (2.4.14): massimo 0,1 %, determinato su 1,0 g.
SAGGIO
Sciogliere 0,600 g in 50 mL di acqua R. Titolare con idrossido di sodio 1 M, determinando potenziometricamente il punto finale (2.2.20).
1 ml di idrossido di sodio 1 M equivale a 63,05 mg di C6H6O3.
STOCCAGGIO
Protetto dalla luce.
IMPURITÀ
Impurezze specificate: A, D, E, I, K, L.
Altre impurezze rilevabili (le seguenti sostanze, se presenti a un livello sufficiente, sarebbero rilevate da uno o dall'altro dei test della monografia. Sono limitate dal criterio di accettazione generale per altre impurità/non specificate e/o dalla monografia generale Sostanze per uso farmaceutico (2034). Non è quindi necessario identificare queste impurezze per la dimostrazione di conformità. Vedere anche 5.10. Controllo delle impurezze nelle sostanze per uso farmaceutico): B, O.
A. benzene-1,2,3-triolo (pirogallolo),
B. benzene-1,3-diolo (resorcinolo),
D. 2,3',4,5',6-bifenilpentolo (floroglucide),
E. benzene-1,2,4-triolo,
I. 2,6-diclorofenolo,
K. 4-clorobenzene-1,3-diolo (4-clororesorcinolo),
L. 3,5-dicloroanilina,
O. 4,6-diclorobenzene-1,3-diolo (4,6-diclororesorcinolo).